A estabilidade do ARN é altamente dependente da temperatura, com taxas de degradação que variam significativamente consoante as condições de armazenamento.Embora o ARN permaneça estável durante longos períodos a temperaturas muito baixas (-20°C a -80°C), a sua integridade diminui progressivamente a temperaturas mais elevadas, especialmente acima de 4°C.O armazenamento a curto prazo à temperatura ambiente é possível, mas acarreta riscos de degradação mais elevados do que em condições de refrigeração ou congelamento.
Pontos-chave explicados:
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Armazenamento a temperaturas ultra-baixas (-20°C a -80°C)
- O ARN permanece estável durante meses a anos quando armazenado a -20°C ou -80°C.
- Os ciclos repetidos de congelação-descongelação (até 10 vezes) não degradam significativamente o ARN, tornando estas temperaturas ideais para a conservação a longo prazo.
- No entanto, os congeladores devem ser evitados devido às flutuações de temperatura que podem comprometer a estabilidade.
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Armazenamento refrigerado (4°C)
- O ARN pode ser armazenado a 4°C durante um máximo de 14 dias sem degradação significativa.
- A evaporação dos tampões de armazenamento pode ocorrer ao longo do tempo, pelo que se recomenda que os tubos sejam bem fechados.
- Adequado para experiências de curto prazo, mas não ideal para armazenamento prolongado.
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Temperatura ambiente (20-25°C)
- O ARN permanece estável durante cerca de 48 horas à temperatura ambiente, mas os riscos de degradação aumentam para além deste período.
- A contaminação com RNase ou a exposição à luz UV pode acelerar a degradação, pelo que as precauções de manuseamento são fundamentais.
- É melhor utilizar para processamento imediato do que para armazenamento.
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Factores críticos que influenciam a estabilidade do ARN
- Contaminação por RNase:Mesmo quantidades vestigiais de RNases podem degradar rapidamente o ARN, pelo que é essencial utilizar tubos e reagentes isentos de RNases.
- Composição do tampão:O armazenamento em tampões inibidores de RNase (por exemplo, tampão TE ou soluções comerciais de estabilização de ARN) aumenta a estabilidade.
- Concentração da amostra:O ARN diluído degrada-se mais rapidamente; as amostras concentradas são mais resistentes.
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Recomendações práticas para os compradores
- Dar prioridade consumíveis sem RNase (tubos, pontas) para minimizar os riscos de contaminação.
- Para laboratórios sem congeladores ultra-baixos, reagentes de estabilização do ARN (por exemplo, RNA later) podem aumentar a estabilidade à temperatura ambiente.
- Considere o ARN liofilizado para aplicações que requerem armazenamento à temperatura ambiente, uma vez que resiste melhor à degradação do que as amostras líquidas.
Ao compreender estes perfis de estabilidade dependentes da temperatura, os investigadores e os compradores podem tomar decisões informadas sobre o manuseamento do ARN, o equipamento de armazenamento e os consumíveis para garantir a integridade das amostras.
Tabela de resumo:
| Temperatura de armazenamento | Duração da estabilidade | Considerações chave |
|---|---|---|
| -20°C a -80°C | Meses a anos | Evitar congeladores; estável mesmo após vários ciclos de congelação-descongelação. |
| 4°C (Refrigerado) | Até 14 dias | Selar bem os tubos para evitar a evaporação do tampão. |
| Temperatura ambiente (20-25°C) | ~48 horas | Risco de degradação elevado; utilizar manuseamento sem RNase. |
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