Quando se utiliza um rotovap, a temperatura ideal ronda normalmente os 50°C.
Esta temperatura é especialmente importante quando se utiliza um vácuo profundo.
A definição de 50°C assegura uma evaporação eficiente sem danificar a amostra.
Isto é particularmente crucial quando se lida com componentes delicados como péptidos ou proteínas.
Porque é que 50°C é a definição de temperatura ideal
A escolha de 50°C equilibra a necessidade de calor suficiente para facilitar a evaporação.
Também evita o sobreaquecimento de materiais sensíveis.
Sob um vácuo profundo, o ponto de ebulição dos solventes é significativamente reduzido.
Isto permite-lhes evaporar a temperaturas mais baixas do que sob pressão atmosférica normal.
Isto é especialmente importante quando a amostra inclui moléculas biológicas delicadas.
Estas moléculas podem desnaturar-se ou degradar-se a temperaturas mais elevadas.
O papel do vácuo no funcionamento do Rotovap
O vácuo profundo é essencial para baixar o ponto de ebulição dos solventes.
Isto permite o funcionamento a temperaturas mais baixas.
As fontes de vácuo tradicionais, como bombas peristálticas ou aspiradores, são insuficientes.
Não conseguem atingir as baixas pressões (na gama de mTorr) necessárias para um funcionamento eficaz do rotovap.
Por conseguinte, recomenda-se uma bomba de vácuo robusta capaz de atingir estas baixas pressões.
Guia passo a passo para o funcionamento de um Rotovap
1. Ligar a bomba de vácuo
Comece por ligar a bomba de vácuo e deixe-a funcionar durante alguns minutos antes de injetar a amostra.
Esta configuração inicial do vácuo assegura que o sistema está pronto a funcionar.
2. Preparar o Rotovap
Quando o vácuo estiver estável e apresentar uma leitura baixa, injetar um pequeno volume (20% do total) do líquido na válvula rotovap.
O processo de evaporação inicia-se à medida que a temperatura do chiller aumenta ligeiramente.
3. Ajustar a injeção
Monitorizar a temperatura; assim que estabilizar ou começar a descer, abrir lentamente a válvula de injeção para introduzir mais líquido no balão rotativo.
O objetivo é fazer corresponder as taxas de entrada e saída para manter um processo estável.
Conclusão: A combinação perfeita para uma remoção eficiente de solventes
Operar um rotovap a cerca de 50°C sob um vácuo profundo é uma abordagem prática.
Esta combinação garante velocidade e segurança no processo de evaporação.
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