A preparação de amostras é um processo crucial que varia consoante a aplicação específica e a técnica de análise.
Quais são as 6 etapas principais envolvidas na preparação de amostras?
1. Recolha de amostras
Esta é a etapa inicial em que é recolhida uma amostra representativa da fonte.
É importante assegurar o manuseamento e armazenamento adequados da amostra para manter a sua integridade.
2. Enriquecimento da amostra
Nalguns casos, a amostra pode ter de ser enriquecida para aumentar a concentração da substância a analisar.
Isto pode envolver técnicas como a filtração, a centrifugação ou a extração.
3. Preparação da amostra
Esta etapa envolve o processamento da amostra para extrair ou isolar o analito de interesse.
Por exemplo, na análise de ácidos nucleicos, este passo pode envolver técnicas de extração de ácidos nucleicos.
O objetivo é obter uma amostra pura e concentrada para análise posterior.
4. Quantificação da amostra/QC
Depois de a amostra ter sido preparada, é importante quantificar a quantidade de analito presente.
Isto pode ser feito utilizando várias técnicas, como a espetrofotometria ou a fluorimetria.
São também realizadas medidas de controlo da qualidade para garantir a exatidão e a fiabilidade da amostra.
5. Preparação e amplificação da biblioteca
Na análise genómica, esta etapa envolve a construção de bibliotecas que contêm os fragmentos de ADN ou ARN de interesse.
Estas bibliotecas são depois amplificadas para gerar material suficiente para análise a jusante.
6. Enriquecimento de alvos
Em alguns casos, pode ser necessário enriquecer regiões ou alvos específicos dentro da amostra.
Isto pode ser feito utilizando técnicas como a PCR ou a captura de hibridação para amplificar ou capturar seletivamente os alvos desejados.
É importante seguir os protocolos de segurança adequados durante a preparação da amostra para garantir a segurança do operador e evitar a contaminação.
Além disso, a escolha dos métodos de moagem e trituração, bem como a seleção do equipamento adequado, deve basear-se no tipo de amostra e no tamanho de partícula pretendido.
A consideração de factores como a quantidade de amostras, caraterísticas específicas e orçamento pode ajudar a otimizar a eficiência e eficácia do processo de preparação de amostras.
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