No que diz respeito à imagiologia por infravermelhos de amostras biológicas, uma das técnicas mais eficazes é atécnica de Nujol mull. Este método consiste em preparar a amostra biológica esmagando-a até obter um pó fino e misturando-a depois com Nujol, um tipo de óleo mineral. A mistura é então espalhada em placas de sal, normalmente feitas de KBr ou NaCl, que são transparentes à radiação IR. Finalmente, a amostra é colocada no trajeto de um feixe de IV para análise espectroscópica.
Que técnica pode ser utilizada para a obtenção de imagens por IV de amostras biológicas? (4 passos para dominar a técnica de Nujol Mull)
1. Preparação da amostra
O primeiro passo na técnica de Nujol mull é preparar a amostra biológica. Isto implica triturar a amostra, que pode ser constituída por tecidos, células ou outros materiais biológicos, até obter um pó fino. O objetivo é reduzir o tamanho médio das partículas para cerca de 1 a 2 microns. Isto assegura que as partículas são suficientemente pequenas para transmitir eficazmente a luz infravermelha.
2. Mistura com Nujol
De seguida, a amostra finamente moída é misturada com Nujol, um tipo de óleo mineral. O Nujol actua como um agente mulling, ajudando a formar uma pasta homogénea com a amostra em pó. Uma das vantagens da utilização do Nujol é o facto de não absorver significativamente na região do IV. Isto permite observar claramente o espetro da amostra biológica.
3. Aplicação em placas de sal
A mistura Nujol-amostra é então aplicada numa face de uma placa de KBr ou NaCl. Coloca-se outra placa por cima e espalha-se a mistura uniformemente entre as placas, esfregando suavemente. A película resultante deve ser ligeiramente translúcida e sem bolhas, o que indica uma preparação correta.
4. Análise por infravermelhos
Finalmente, a amostra preparada é analisada com um espetrómetro de IV. A radiação IV passa através da película fina e a absorção de comprimentos de onda específicos pelas moléculas biológicas fornece informações sobre a sua estrutura e grupos funcionais.
Este método é particularmente adequado para amostras biológicas porque permite a análise de amostras que não são facilmente solúveis ou que se podem degradar em solução. A técnica Nujol mull é simples, relativamente rápida e não requer equipamento dispendioso, o que a torna acessível a vários contextos laboratoriais.
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