Se a esterilização em autoclave não for adequada para esterilizar meios de cultura, um método alternativo éesterilização por filtração. Este método consiste em passar os meios de cultura através de um filtro com poros suficientemente pequenos para reter os microrganismos, removendo-os efetivamente dos meios de cultura sem os expor ao calor.
Resumo da esterilização por filtração:
A esterilização por filtração é um processo em que os meios de cultura são esterilizados passando-os através de um filtro com poros muito pequenos, normalmente 0,22 microns, que são capazes de reter bactérias, vírus e outros microrganismos. Este método é particularmente útil para meios sensíveis ao calor, em que os componentes podem ser degradados pelo calor.
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Explicação pormenorizada:
- Princípio da filtração:
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A esterilização por filtração baseia-se na barreira física proporcionada por filtros com poros suficientemente pequenos para impedir a passagem de microrganismos. O tamanho de poro padrão para a maioria dos filtros biológicos é de 0,22 microns, o que é eficaz na captura de bactérias e da maioria dos vírus.
- Equipamento utilizado:
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O equipamento primário utilizado na esterilização por filtração inclui filtros de seringa, sistemas de filtração a vácuo ou unidades de filtração accionadas por pressão. Estes sistemas são concebidos para lidar com diferentes volumes de meios e podem ser adaptados a várias necessidades laboratoriais.
- Procedimento:
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O meio de cultura é preparado como habitualmente, mas em vez de ser autoclavado, é passado através do filtro. Isto pode ser feito deitando o meio numa seringa equipada com um filtro e, em seguida, expelindo o meio através do filtro para um recipiente esterilizado. Para volumes maiores, é utilizada uma configuração de filtração por vácuo ou pressão.
- Vantagens:
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A principal vantagem da esterilização por filtração é o facto de não envolver calor, o que a torna ideal para meios que contêm componentes termolábeis. Este método também permite a esterilização de meios que podem ser alterados pelo calor, como os que contêm enzimas, vitaminas ou outros aditivos sensíveis ao calor.
- Considerações:
Embora a filtração seja eficaz, requer um manuseamento cuidadoso para garantir que o filtro não fica obstruído e que o processo é conduzido em condições estéreis para evitar a recontaminação. Além disso, o custo dos filtros e do equipamento necessário para a filtração pode ser mais elevado do que o custo associado à autoclavagem.Conclusão:
A esterilização por filtração é uma alternativa viável à autoclavagem para meios de cultura, especialmente quando se trata de componentes sensíveis ao calor. Fornece um método para alcançar a esterilidade sem comprometer a integridade dos meios, tornando-a uma técnica essencial em laboratórios de microbiologia e de outras ciências da vida.
